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Invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III的生理功能包括三種活性

發(fā)布時間: 2020-07-21  點擊次數(shù): 3817次
   Invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III是從克隆有莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶基因的大腸桿菌中表達(dá)并經(jīng)過柱純化分離出來的重組蛋白,是由一個71kDa的單亞基組成的反轉(zhuǎn)錄聚合酶。本酶經(jīng)修飾,RNaseH的活性比普通的要弱很多,因此在合成cDNA鏈的過程中,RNA模板的降解降低,從而使得率提高。
 
  Invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III的生理功能:
  反轉(zhuǎn)錄過程由反轉(zhuǎn)錄酶催化,該酶也稱依賴RNA的DNA聚合酶,即以RNA為模板催化DNA鏈的合成。合成的DNA鏈稱為與RNA互補NA(cDNA)。
 
  反轉(zhuǎn)錄酶都具有多種酶活性,主要包括以下三種活性。
 ?。?)DNA聚合酶活性
  以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物,多為賴氨酸的tRNA,在引物tRNA3'-末端以5'→3'方向合成DNA。
 
  (2)RNaseH活性(RNA酶)
  由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子,將由RNaseH從RNA5'端水解掉RNA分子。
 
 ?。?)DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性
  以反轉(zhuǎn)錄合成的一條DNA單鏈為模板,以dNTP為底物,再合成第二條DNA分子。
 
  除此之外,有些反轉(zhuǎn)錄酶還有DNA內(nèi)切酶活性,這可能與病毒基因整合到宿主細(xì)胞染色體DNA中有關(guān)。
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